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成功率达100%,上交团队提出AI辅助的酶热稳定性工程策略,设计热稳定性的组合突变体
利用ai高效提升酶热稳定性:上海交大研究团队取得突破
酶的热稳定性对于生物技术和工业应用至关重要。传统方法通过逐步引入单点突变来优化酶的热稳定性,过程费时且效率低下。近日,上海交通大学杨广宇研究员团队与洪亮教授合作,在《mLife》杂志发表研究成果,提出了一种基于人工智能的策略,显著提高了酶热稳定性工程的效率。
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该研究利用蛋白质语言模型Pro-PRIME,结合少量实验数据进行微调,预测组合突变体的稳定性和活性。通过对肌酸酶进行两轮设计,成功获得了50个具有卓越热稳定性的组合突变体,设计成功率达到惊人的100%。最佳突变体13M4包含13个突变位点,其热稳定性显著提高(Tm值提升10.19°C,58°C下半衰期增加约655倍),同时活性保持不变。

研究亮点:
- 高效的组合突变策略: 两轮设计即可获得50个高稳定性突变体,效率远超传统方法。
- 精准的上位效应预测: 微调后的模型能够准确预测组合突变体的稳定性和活性,包括复杂的上位效应。
- 长程上位效应机制的揭示: 动态相关矩阵分析揭示了远距离突变位点之间动力学的关联性。
- 显著提升的酶热稳定性: 最佳突变体13M4的热稳定性大幅提升,同时活性保持不变。
- 广泛的应用前景: 该策略有望应用于其他关键酶分子的定向进化。

图1展示了该策略的四个步骤:数据收集、模型微调、组合序列空间预测和突变体验证。图2显示了组合突变体的热稳定性和相对活性数据,突出了最佳突变体的优异性能。图3则深入分析了突变之间的上位效应,揭示了其背后的动力学机制。
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这项研究表明,将高质量实验数据与先进的AI模型相结合,能够显著提升蛋白质工程的效率,为酶的定向进化和工业应用开辟了新的途径。

论文链接:https://www.php.cn/link/77382415bbfc9bcb5b2f5b5f5724406c
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2025-02-03
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